Cell Signaling Technology

高内涵筛选

Cell Signaling Technology (CST) Cell Signaling Technology (CST)提供不断增长的为药物开发研究者所需的基于细胞的检测试剂和试剂盒。无论您的研究需要初级的基于细胞的筛选,还是您正在进行二级基于细胞的检测,CST提供了磷酸化特异抗体和总蛋白抗体、底物和检测试剂盒等广阔的产品线来满足您的需求。而且,CST已经为免疫荧光(IF)验证了超过500种激活状态特异的抗体(如磷酸化特异)和总蛋白抗体,如自动的基于细胞的检测。为了全面阐述特定的通路,CST也开发了多靶标的免疫荧光试剂盒,它包含了许多预先优化的抗体,可以在全细胞检测中使用。

想了解更多信息请联系我们的高内涵筛选组:HCS@cellsignal.com.

多靶标HCA试剂盒

PathScan®多靶标HCA试剂盒允许用户检测按通路或生物过程分类的8个信号分子。

查看PathScan® 多靶标HCA试剂盒

CST 用于高通量筛选的抗体

The Acumen® eX3 (*TTP LabTech, www.ttplabtech.com/products/acumen/)是一台用于高内涵筛选的激光扫描荧光孔板细胞计数器。CST用免疫荧光验证过的激活状态特异抗体和对照抗体一如往常的用于实验室的高内涵平台,包括单一的通路分析(例 A)和系统生物分析(例B)。

例A. 单一的通路分析:在茴香霉素刺激的HeLa细胞中检测MAPK通路抑制剂。三个下游节点(磷酸化CREB、磷酸化Akt和磷酸化HSP27)被选来评估抑制剂的效率。磷酸化Rb和剪切的caspase-3也用来检测抑制剂分别在增殖和凋亡的效应。细胞在96孔板中培养和处理,并用CST的抗体标记。培养板在Acumen®高内涵平台进行分析。

With and without InhibitorsMAPK pathway inhibitor

从磷酸化Akt和磷酸化HSP27水平降低(参照上面的IC50值和图)的证据得出,MAPK抑制剂抑制了细胞信号,然而毒性没有增加(请看上图磷酸化Rb和剪切的caspase-3水平的微小变化)。

例B. 系统生物学分析:用达沙替尼和伊马替尼处理Bcr/Abl阳性,K562和Bcr/Abl阴性SEM细胞系的抗体芯片数据。细胞在96孔板中培养和处理,并用一系列CST的抗体进行标记。孔板在Acumen® eX3高内涵平台和一个高通量流式细胞分析仪上进行分析。

Cell-based Assay Fluorescence

相比载体,荧光强度增高的用红色表示,荧光强度降低的用绿色表示。这两种药物在K562细胞中都抑制了Bcr/Abl特异的信号通路,而在SEM细胞中没有此现象。

15 inhibited targets - imatinib15 inhibited targets - dasatinib

根据与载体比较的抑制百分比,96个节点的效应被区分出来。前15个被抑制的靶点在这些图中展示出来了(上图-伊马替尼,下图-达沙替尼)。这两种化合物的效应强度和被影响的靶点稍微有些不同。

*数据可能通过需要相关第三方知识产权许可的方法/设备/成分获得。

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